조직 표본 마운팅에 널리 사용되는 방법은 무엇입니까? 입증된 기술로 완벽한 조직 슬라이드를 만드세요

영구 조직 슬라이드의 경우, 표본을 마운팅하는 데 가장 널리 사용되는 방법은 수지성 마운팅 매체를 사용한 커버슬립 덮기입니다. 이 기술은 유리 슬라이드 위의 염색된 조직 절편 위에 투명하고 접착제와 같은 물질을 놓고 얇은 유리 커버슬립으로 덮어 현미경 관찰을 위한 영구적이고 고해상도의 준비물을 만드는 것을 포함합니다.

마운팅은 최종 보호 단계일 뿐만 아니라 중요한 광학 및 보관 절차입니다. 주요 목표는 표본의 굴절률을 유리 슬라이드의 굴절률과 일치시켜 빛의 산란을 최소화하여 선명한 이미지를 생성하는 동시에 수십 년 동안 조직을 보존하는 것입니다.

마운팅의 목적: 단순한 보호 그 이상

커버슬립이 물리적으로 조직을 보호하지만, 마운팅의 진정한 목적은 빛의 물리학과 장기 보존의 필요성에 뿌리를 두고 있습니다.

광학적 선명도 달성

마운팅 매체의 가장 중요한 기능은 광학적 선명도를 제공하는 것입니다. 빛이 한 물질에서 다른 물질(예: 유리 슬라이드, 조직을 거쳐 공기)로 통과할 때 빛은 굴절됩니다.

마운팅 매체는 굴절률(일반적으로 ~1.5)이 유리 슬라이드와 고정된 조직의 굴절률과 매우 가깝기 때문에 선택됩니다. 이러한 균일성은 빛의 굴절을 최소화하여 산란을 줄이고 현미경에서 선명하고 깨끗하며 고해상도의 이미지를 얻을 수 있도록 합니다.

장기 보존 보장

적절하게 마운팅된 슬라이드는 밀봉된 틈을 만듭니다. 이는 섬세한 염색된 조직 절편을 물리적 손상, 먼지, 산화 및 미생물 성장으로부터 보호합니다.

영구 수지성 매체는 시간이 지남에 따라 경화되어 커버슬립을 영구적으로 고정하고 수년 또는 수십 년 동안 상당한 열화 없이 보관하고 연구할 수 있는 보관 품질의 표본을 만듭니다.

기술의 핵심: 마운팅 매체

마운팅 매체의 선택은 마운팅 과정에서 가장 중요한 결정입니다. 이 매체들은 각각 특정 용도가 있는 두 가지 주요 범주로 나뉩니다.

수지성 (비수용성) 마운턴트

이들은 일상적인 조직학에서 가장 일반적인 유형입니다. 이들은 자일렌 또는 톨루엔과 같은 유기 용매에 용해된 아크릴 또는 폴리스티렌과 같은 합성 수지입니다.

이러한 매체는 물과 섞이지 않기 때문에 조직 절편은 먼저 일련의 알코올 욕조를 통해 완전히 탈수된 다음 마운팅 전에 자일렌과 같은 시약으로 "투명화"되어야 합니다. 이 과정은 헤마톡실린 및 에오신(H&E)과 같은 염색의 표준이 되게 합니다.

수용성 마운턴트

이들은 수지성 매체에 필요한 탈수 과정을 조직이나 염색이 견딜 수 없을 때 사용되는 물 기반 매체, 본질적으로 젤 또는 시럽입니다.

이는 냉동 절편 분석, 특정 면역형광 프로토콜, 그리고 염료가 알코올에 용해되는 염색 방법(예: 오일 레드 O와 같은 지방 염색)과 같은 기술에 중요합니다.

절충점 이해하기

마운팅 방법 간의 결정은 영구성에 대한 필요성과 염색 절차의 화학적 호환성 사이의 균형입니다.

영구성 대 호환성

수지성 마운트는 우수한 광학 품질을 제공하며 영구적인 것으로 간주됩니다. 그러나 사용되는 용매(알코올, 자일렌)는 지질과 같은 특정 세포 구성 요소를 파괴하거나 추출하거나 형광 신호를 소광시킬 수 있습니다.

수용성 마운트는 이러한 호환성 문제를 해결하지만 일반적으로 비영구적이거나 준영구적인 것으로 간주됩니다. 시간이 지남에 따라 염료가 바래거나 매체를 통해 확산될 수 있으며, 마운트 자체가 건조되어 결정화되어 이미지가 저하될 수 있습니다.

일반적인 함정: 기포 및 매체 번짐

가장 흔한 기술적 오류는 커버슬립 아래에 기포를 가두는 것입니다. 이 기포들은 조직의 시야를 방해하며 매체가 굳기 시작하면 제거하기 어렵습니다.

또 다른 문제는 매체를 너무 많이 또는 너무 적게 사용하는 것입니다. 너무 많으면 매체가 커버슬립 아래에서 "번져" 끈적한 혼란을 야기합니다. 너무 적으면 불완전한 밀봉과 적절한 광학적 투명도가 없는 영역이 생깁니다.

표본에 맞는 올바른 방법 선택

마운팅 방법의 선택은 염색 기술과 보관 목표에 의해 완전히 결정되어야 합니다.

• 장기 보관을 위한 일상적인 조직학(예: H&E, 삼색 염색)에 중점을 두는 경우: 철저한 탈수 및 투명화 후 수지성 비수용성 마운팅 매체를 사용하십시오.
• 지질 분석 또는 면역형광 수행에 중점을 두는 경우: 표적 분자의 손상을 방지하기 위해 염색 직후 수용성 마운팅 매체를 사용하십시오.
• 살아있는 염색되지 않은 세포(예: 물 속의 박테리아) 관찰에 중점을 두는 경우: 영구적인 보존이 필요하지 않으므로 물이나 식염수를 사용한 간단한 임시 습식 마운트를 사용하십시오.

궁극적으로 올바른 마운팅 프로토콜을 선택하는 것은 염색된 조직 조각을 내구성이 뛰어나고 광학적으로 뛰어난 진단 도구로 변환하는 데 필수적입니다.

요약표:

마운팅 방법	가장 적합한 용도	주요 특징
수지성 마운팅 매체	일상적인 조직학(H&E), 영구 보관	우수한 광학적 선명도, 장기 보존, 탈수 필요
수용성 마운팅 매체	면역형광, 지방 염색, 냉동 절편	수성 기반, 민감한 표적 보존, 준영구적
임시 습식 마운트	생세포 관찰, 빠른 검사	간단한 준비, 즉시 사용, 장기 보관용은 아님

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