로토뱁을 작동해야 하는 온도는 일반적으로 약 50°C이며, 특히 고진공과 함께 사용할 경우 더욱 그렇습니다. 이 온도 설정은 특히 펩타이드나 단백질과 같은 섬세한 성분을 다룰 때 시료 손상 없이 효율적으로 증발시키는 데 매우 중요합니다.
온도 설정에 대한 설명:
50°C를 선택한 것은 증발을 촉진하기 위한 충분한 열의 필요성과 민감한 물질의 과열을 방지해야 하는 필요성 사이의 균형을 맞추기 위한 전략적 선택입니다. 고진공에서는 용매의 끓는점이 현저히 낮아져 일반 대기압에서보다 낮은 온도에서 증발할 수 있습니다. 이는 고온에서 변성되거나 분해될 수 있는 섬세한 생물학적 분자가 시료에 포함되어 있을 때 특히 중요합니다.진공의 역할:
- 고진공은 용매의 끓는점을 낮추는 데 필수적이며, 이를 통해 더 낮은 온도에서 작동할 수 있습니다. 연동 펌프나 흡인기와 같은 기존의 진공 소스는 효과적인 로토뱁 작동에 필요한 낮은 압력(mTorr 범위)을 달성할 수 없기 때문에 이러한 목적에는 불충분합니다. 따라서 이러한 낮은 압력에 도달할 수 있는 견고한 진공 펌프가 권장됩니다.작동 단계:
- 진공 펌프를 시작합니다: 시료를 주입하기 전에 진공 펌프를 시동하고 몇 분 동안 아래로 내리는 것으로 시작합니다. 이 초기 진공 설정은 시스템이 작동할 준비가 되었는지 확인합니다.
- 로토뱁을 프라임합니다: 진공이 안정되고 낮은 수치가 표시되면 소량(전체의 20%)의 액체를 로토뱁 밸브에 주입합니다. 냉각기 온도가 약간 상승하면 증발 과정이 시작됩니다.
주입량을 조정합니다: 온도가 안정화되거나 떨어지기 시작하면 주입 밸브를 천천히 열어 로터리 플라스크에 더 많은 액체를 주입합니다. 목표는 안정적인 공정을 유지하기 위해 입력 및 출력 속도를 맞추는 것입니다.
결론
